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人HE4測定試劑盒96T（酶聯免疫吸附法）

人HE4測定試劑盒96T（酶聯免疫吸附法）

實驗原理
HE4 EIA是一種非競爭性的夾心酶聯免疫方法。它通過兩種小鼠單克隆抗體，即2H5和3D8，直接針對于HE4結構域中C-WFDC的兩個抗原決定簇位點。操作時將標準品、質控品及患者標本和生物素標記的抗HE4鼠單克隆抗體（MAb）2H5滴加至鏈霉親和素包被的微孔板中一起溫育。在溫育過程中，標準品或患者標本中存在的HE4抗原通過生物素標記的抗HE4單克隆抗體（MAb）吸附到鏈霉親和素包被的微孔板上。隨后清洗微孔
板，加入HRP標記的抗HE4單克隆抗體3D8進行溫育反應。經過第二次清洗后，向每孔加入底物/顯色緩沖液（過氧化氫和3,3',5,5'四甲基聯苯胺）使其發生酶促反應。在酶促反應過程中如果抗原存在則會顯示為藍色。其顏色的深度與標本中HE4的含量呈正比。微板孔中顏色的深度可用酶標儀在620nm （也可選擇加入終止液后在405 nm ）進行檢測。
每次試驗后均需根據每個標準品的濃度與其相對應的吸光度數值繪制標準曲線，患者標本中的HE4濃度即可從標準曲線上讀出。

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